牛奶蛋白质测定的优化操作-凯发k8一触即发

来源: http://www.top17.net/  类别:技术文章  更新时间:2013-12-11  阅读次

      牛奶蛋白质是牛奶检测的重要指标,作为生命的物质基础之一,蛋白质在催化生命体内各种反应进行、调节代谢、抵御外来物质入侵及控制遗传信息等方面都起着至关重要的作用。目前,牛奶蛋白质的测定方法主要为国标凯氏定氮法,是有机化合物含氮量测定最常有的方法,是蛋白质测定的经典方法,即使用蛋白质测定仪来进行测定。蛋白质测定仪适用样品广泛,测定结果准确,重现性好,但试剂消耗量大,检测时间长,消化约6~8 h,且消化后样品需定容,定容时容量瓶未摇匀,很容易出现结晶现象,费时费力。
      为改善国标检测方法样品称样量大,消化时间长,消化后的样品需定容,操作步骤多的现状,本文对样品的称样量进行了优化,经典凯氏定氮法液体样品的称样量为1~25 ml,因牛奶样品均匀度较好,故本方法将样品的称样量优化为1.0~1.5g。将样品的称样量从10g减小到1.5g,其他检测条件不变。如果取样具有代表性,改变样品的称样量,对检测结果的影响不大。
      样品消化时间主要包括氧化时间,沸腾时间。氧化时间中浓硫酸将有机样品中的碳转化成co2(这时的溶液为黑色),氢元素转化为h2o,氮元素转化为铵盐。氧化完毕后,溶液变澄清,进入沸腾时间,在沸腾30 min后,样品中氮元素全部转化为氨,氮的回收率达到最高。样品消化结束后,消化管中应剩余5-6 ml浓硫酸,如果消化时硫酸消耗完了,会造成氮的损失。在消化期间如果硫酸加入量少,样品会出现结晶情况,因此,硫酸用量应适当,而硫酸用量取决于样品量,本方法中硫酸量的优化参照的为国标方法,国标方法10 g样品浓硫酸的用量为20 ml,即1 g样品硫酸消耗的量为2 ml,现将样品的称样量减小为1~1.5 g,硫酸的消耗量应不大于3 ml,为保证样品消化完后浓硫酸的量有剩余,故将硫酸的量定优化为8.5 ml。

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